遵循顯微鏡(jing)設(she)計須符合樣(yang)品(pin)要求(qiu)的(de)(de)原(yuan)則,創建了一(yi)套完全模塊化的(de)(de)成像(xiang)平(ping)臺,可(ke)以(yi)滿足多種(zhong)實驗需求(qiu)。與傳(chuan)統(tong)的(de)(de)研(yan)究技術(例如使用微電極(ji))相比,我(wo)(wo)們的(de)(de)多光子(zi)成像(xiang)系統(tong)能夠(gou)以(yi)更快速度(du)、更大(da)深度(du)和更高強(qiang)度(du)同時讀(du)出和操縱神經元群。我(wo)(wo)們開發了一(yi)個旋(xuan)(xuan)轉主(zhu)體(ti),使顯微鏡(jing)可(ke)繞(rao)樣(yang)品(pin)旋(xuan)(xuan)轉。我(wo)(wo)們還提供各種(zhong)剛(gang)性(xing)主(zhu)體(ti),其(qi)具7.74英(ying)寸高度(du),可(ke)圍(wei)繞(rao)物鏡(jing)提供較大(da)的(de)(de)三維工作空間。
神經元活動(dong)的(de)(de)體(ti)內體(ti)積(ji)成(cheng)像需要亞微(wei)米級空(kong)間(jian)分辨率和(he)毫秒級時間(jian)分辨率。傳統方法(fa)通過連續掃描衍射高斯光(guang)束以創建(jian)3D圖(tu)(tu)像,而基于貝塞爾光(guang)束的(de)(de)多光(guang)子(zi)成(cheng)像依(yi)靠軸(zhou)向延伸(shen)的(de)(de)焦(jiao)點來捕獲體(ti)積(ji)圖(tu)(tu)像。激發光(guang)束的(de)(de)擴展景(jing)深可創建(jian)3D體(ti)積(ji)的(de)(de)2D投影(ying),從(cong)而有效地將2D幀速率轉換為(wei)3D體(ti)積(ji)速率。
三(san)光子激發(fa)(fa)非常適合(he)深層組織成像,且需要高脈沖能量激發(fa)(fa)源,通常在1300 nm或1700 nm附近(jin)。與雙光子成像相比,三(san)光子成像可減少組織散射(she)并降低離焦背景,從而提高信噪比。
Thorlabs的(de)空間(jian)光(guang)(guang)調制器(qi)(SLM)使(shi)用全(quan)息圖案來同時刺激(ji)樣品中多個(ge)位(wei)置的(de)光(guang)(guang)活化。SLM設計用于通過飛秒(miao)脈沖進行雙光(guang)(guang)子激(ji)發,SLM可控制激(ji)勵激(ji)光(guang)(guang)束輪廓上(shang)的(de)相(xiang)位(wei)以生成數百個(ge)用戶確(que)定的(de)焦(jiao)點。